Résumé du document Nous sommes des organismes hétérotrophes, c'est-à-dire que nous consommons des matières organiques afin de pouvoir nous développer et survivre. Ces matières sont constituées d'éléments trop « gros » et donc non assimilables directement par les cellules. C'est pour cela que les enzymes sont essentielles dans la phase chimique de la digestion qui transforme les macromolécules en nutriments. Notre digestion est progressive: - Les gros aliments simples sont attaqués à plusieurs niveaux: L'amidon par la salive puis par le suc pancréatique, Les protéines par le suc gastrique puis par le suc pancréatique. - Les petits aliments simples sont tous digérés dans l'intestin grêle. - Dans l'intestin grêle, tous les aliments sont transformés en nutriments: Glucides: glucides simples (glucose, galactose, fructose,... ) Protéines: acides aminés Lipides: acides gras, glycérol, lipides partiellement hydrolysés [... Biolo-ecolo.fr - TP L'activité de l'amylase. ] B) Hydrolyse enzymatique des lipides Dans cette expérience, on met une émulsion de lipides en présence de lipases contenus dans une solution pancréatique.
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Digestion de l'amidon par l'amylase salivaire Objectif: Découvrir le mode d'action d'une enzyme hydrolysante: l'amylase Définition: une enzyme est une protéine qui facilite les réactions chimiques sans participer ni aux réactifs, ni aux produits Préparation: Solution d'empois d'amidon à 5% Solution d'amylase salivaire: - Quelques millilitres Salive diluée deux fois d'un des deux binômes o Il est important de noter que seule la personne ayant salivée manipule sa propre salive. Matériel par binôme: - Un bain-marie - Un portoir avec 4 tubes - Eau distillée (pour les témoins négatifs) - Plaques de coloration - Eau iodée - Liqueur de Féhling - Une réserve de chacune des 2 solutions - Pipettes - Un stylo feutre - Un chronomètre Protocole: - Dans le tube 1 verser 10mL d'empois d'amidon et 2 mL de solution d'amylase salivaire. Tp hydrolyse enzymatique de l amidon par l amylase correction formula. Agiter. - Dans le tube 2 verser 10mL d'eau distillée et 2 mL de solution d'amylase salivaire. - Identifier a l'aide d'un feutre chaque compte goutte « 1 » et « 2 » que vous aller utiliser à chaque prélèvement.
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Cycle et niveau de classe
Lycée, Première enseignement de spécialité
Objectifs pédagogiques
Mise en évidence d'une réaction chimique réalisée par une protéine enzymatique: l'hydrolyse de l'amidon par l'amylase. Réflexion sur le prélèvement et le traitement des données. Thème La Terre, la vie et l'organisation du vivant
Les enzymes, des biomolécules aux propriétés catalytiques
Compétences et capacités travaillées
Manipuler en respectant les consignes. Constituer une base de données par collaboration. Traiter une base de données (esprit critique, choix des données, …). Les hydrolyses enzymatiques. Construire un graphique à l'aide d'un outil numérique. Outils numériques utilisés - intérêts et limites
Logiciel Libre Office Calc ou Microsoft Office Excel avec une fiche méthode adaptée pour la construction graphique ( lien pdf)
Google Sheet (en tant qu'outil collaboratif)
L'outil collaboratif permet de partager l'ensemble des données afin de faciliter le tri et la réflexion quand à celles-ci.
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L'atome de ZINC se trouve également au niveau du site actif
Trois AA appartiennent au site catalytique proprement dit: HIS69, GLU72 et HIS196
Trois AA appartiennent au site de fixation: ARG145, TYR248 et GLU270
Mettre en évidence les AA du site actif et ceux du substrat
Le substrat en vert et les acides aminés du site actif, remarquez l'atome de zinc!
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Alors que pour le tube 2ne contenant pas d'amylase, la couleur aura plutôt tendance à stagner. Je peux donc conclure que l'amylase a une action sur l'amidon. En effet, l'amidondisparait au cours du réaction enzymatique est alors une transformation, elle permet de « découper » des sucres liés, amidon en sucres libres. |
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Si mon hypothèse est validée, alors les sucres réducteurs seront présents uniquement dans le tube avec l'amidon. Si les sucres réducteurs apparaisent dans plusieurs tubes, alors c'est que la glycosidase n'est pas spécifique. Etape 2: Mettre en œuvre un protocole de résolution pour obtenir des résultats exploitables. Tube
1
2
3
4
5
6
Substrat 1 mL
amidon
glycogène
Saccharose
Solution de glycosidase
1 mL
0 mL
Eau dsitillée
Les tubes sont laissés au bain marie à37°C pendant 5 minutes, on réalise ensuite une recherche de sucres réducteurs avec un test àla liqueur de Fehling. En présence d'un sucre réducteur, il se forme un précipité rouge brique. Tp hydrolyse enzymatique de l amidon par l amylase correctionnel. Etape 3: Présenter les résultats pour les communiquer. Tube n°
Résultat du test
à la
liqueur de Fehling
Un précipité rouge brique se forme avec les tubes 1 et 2; il y a donc apparition d'un sucre réducteur dans les tubes n°1 avec l'amidon et n°2 avec le glycogène. Etape 4: Exploiter les résultats obtenus pour répondre au problème. L'enzyme catalyse l'hydrolyse de l'amidon et du glycogène; elle n'est donc pas spécifique.
Etape 1: Concevoir une stratégie pour résoudre une situation problème (durée maximale: 10 minutes)
Proposer une démarche d'investigation permettant de tester l'hypothèse qu'une glycosidase donnée catalyse de façon spécifique la réaction d'hydrolyse d'un glucide alimentaire. D'après les informations disponibles, je sais que les glycosidases sont des enzymes digestives qui catalysent l'hydrolyse des glucides, comme l'amidon, le glycogène ou le saccharose en molécules simples. Je peux donc émettre l'hypothèse suivante:
Si la glycosidase catalyse de façon spécifique la réaction d'hydrolyse d'un glucide alimentaire, par exemple l'amidon,
alors elle hydrolysera en sucre simple uniquement les molécules d'amidon. Pour tester cette hypothèse je propose la stratégie suivante. Tp hydrolyse enzymatique de l amidon par l amylase corrections. Je vais placer au bain marie à37° une serie de tubes contenat l'enzyme avec les glucides àtester et une série de témoins avec les glucides seuls. Je vais ensuite rechercher l'apparition de sucre réducteurs avec un test àla Phénylhydrazine ou àla Liqueur de Felhing (bleue) ou mieux en réalisant une chromatographie.